供稿：魏书程，北京大学
大家好，今天为大家分享一篇ACSChem.Biol.的文章，题为ExploitingCD22toSelectivelyTolerizeAutoantibodyProducingB?CellsinRheumatoidArthritis，本文通讯作者为Scripps研究所的MatthewMacauley教授。他们课题组从事细胞表面糖类抗原的结合蛋白研究，发展具靶向性的配体与脂质体复合物，调控免疫细胞激活以及分化，并在此基础上开发对免疫相关疾病的新型疗法。
类风湿性关节炎（RA）是一种系统性自身免疫性疾病，主要影响关节滑膜，其特征为关节炎、骨质侵蚀、骨密度降低和关节软骨损伤等。在滑膜组织内的免疫细胞释放出白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）等炎症细胞因子，引发炎症反应。现有控制炎症的疗法主要为使用非甾体类抗炎药（NSAIDs）控制病情的抗风湿药物（DMARDs）等。近来发展出的新型诊断工具，可以识别处于高风险病发阶段的RA患者，并对其制定针对性的治疗方案。其中，透过遗传学研究和血清筛查显示，HLA-DRB1等位基因与RA发病率高度相关，并与瓜氨酸蛋白自身抗体（ACPA）的产生密切相关。
HLA-DRB1为MHCII复合物的一部份，在抗原呈递过程中承载肽段抗原。然而，其自身的精氨酸在精氨酸脱亚胺酶（PAD）的催化下能够进行瓜氨酸化，并在抗原呈递过程中被B细胞受体BCR错误识为抗原，最终导致B细胞产生靶向瓜氨酸抗原表位的抗体，亦即ACPA。这些抗体能在血液中被检测出来，成为RA诊断的一个指标，血液中带有ACPA或类风湿因子（RF）的病例被划分为血清阳性，反之则为阴性。大约七成RA患者为血清阳性，其表现为较严重的骨和关节损坏，并且对病情控制类的生物制剂有更好的反应，例如B细胞耗竭疗法中的Rituximab单抗。Rituximab可以有效地靶向表达CD20的B细胞，主要为na?ve和记忆B细胞，而分化成浆细胞的B细胞则不能被靶向。虽然靶向这两种B细胞足以有效控制病情，但能产生ACPA的B细胞实际上只占了极少一部份（约1/），而Rituximab无差别的靶向所有na?ve和B细胞，无疑会对正常的免疫造成不必要的损害，更合理的方法是只对瓜氨酸抗原敏感，或者能够产生ACPA的B细胞进行靶向。
环瓜氨酸化肽（CCP）是一种带有多个瓜氨酸残基的环状合成肽，原被设计出来模拟瓜氨酸化的抗原表位，最初用于检测RA患者血清中的ACPA。能够识别CCP的抗体只存在于RA患者血清中，不会在建康个体中出现。以此为基础，作者开发出一种耗竭瓜氨酸特异性B细胞的策略：Siglec-engageTolerance-inducingAntigenicLiposomes（STALs）。STALs含有CCP抗原表位和CD22的高效配体，锚定在脂质体表面。STALs通过CCP上的抗原结合能够识别ACPA的B细胞，CD22配体则可结合作为B细胞免疫检查点的CD22，从而抑制B细胞的激活。
作者首先从RA捐赠者和健康捐赠者中检测CD22在各种B细胞中的表达，发现在两者中并无颢着差异，CD22主要在na?ve和记忆B细胞中表达，在浆细胞中则停止表达，表明CD22适合作为此疗法的靶点。然后作者对各种B细胞进行分选，对其施以不同的刺激条件，透过检测其表达的IgG含量，筛选出最高效分泌抗体的B细胞（IgD-CD27+，一种记忆B细胞）以及最佳刺激条件。
接下来作者检测CCP-STALs能否降低血液中B细胞产生ACPA能力。在建康捐赠者以及RA捐赠者身上取出B细胞后，对其进行刺激。结果显示，在RA捐赠者的样本上检测出ACPA，而在建康捐赠者的样本中则没有。下一步，作者在脂质体上修饰上CCP（CCP-Lip）或者同时修饰CCP以及CD22L（CCP-STALs），并在对RA患者的B细胞进行刺激后加入二者。结果显示，加入CCP-Lip可被直接识别为瓜氨酸抗原，致使B细胞产生ACPA。而加入CCP-STALs的B细胞，ACPA的产生被有效抑制了。加入这两种脂质体后，B细胞产生的IgG总量并没有被显著的抑制，说明CCP-STALs能够有效抑制B细胞产生ACPA的同时，对于B细胞生产正常抗体的功能不会造成影响。
最后，作者在能够产生ACPA的SJL/Jmice小鼠中测试CCP-STALs在活体动物上的效果。在第0天对小鼠注射CCP-Lip、CCP-STALs以及PBS对照，然后在第15天注射CCP-Lip刺激B细胞产生ACPA。注射过CCP-STALs的小鼠受到了保护，相比起其他两组产生更低滴度的ACPA。
B细胞作为RA的治疗靶标目前备受