背景介绍
感染，尤其是细菌感染，其可怕之处在于发展迅速，如若治疗不及时会显著降低患者的存活率，因此早期诊断和治疗对改善细菌感染患者的预后尤为重要。目前，临床上常用血培养、白细胞计数、C反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）等指标鉴别细菌感染。血培养虽是诊断细菌感染的金标准，但其检测周期长、易污染并常出现假阴性，而白细胞计数、CRP和PCT在鉴别细菌感染时特异性并不高，在非感染引起的炎症反应中亦见升高。相比这些指标，中性粒细胞的CD64（PMNCD64）表达在机体感染细菌时迅速升高，具有较高的灵敏性和特异性。
PMNCD64为何可用于鉴定细菌感染？
CD64是具有高亲和力的免疫球蛋白（IgG）Fc片段I型受体(FcγRI)，表达受细胞因子调控，起到体液免疫和细胞免疫的桥梁作用。
?CD64被认为是中性粒细胞活化的标志物之一，健康生理状态下CD64在中性粒细胞上低表达，而机体受到感染或内毒素入侵时，释放的促炎因子γ-干扰素（γ-IFN）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）刺激中性粒细胞激活，PMNCD64表达在4-6h内迅速升高，高表达的CD64和其配体IgG结合后，促使中性粒细胞通过抗体依赖细胞介导的细胞毒作用、细胞吞噬和免疫复合物清除作用对病原微生物进行清除。
?相比中性粒细胞活化的其他标志物，如CD16、CD45RA、CD18、CD11b和CD62L，PMNCD64在健康人群中的表达水平很低，动态范围窄，而机体受到感染时PMNCD64表达会升高5-10倍，因此可显著区分感染和健康人群。
?PMNCD64升高只特异性的和感染、脓毒症相关，不受白血病、骨髓增生异常综合征、和激素治疗等非感染性疾病影响。
PMNCD64鉴定细菌感染的厉害之处！
?CD64表达稳定，抗凝血样本在常温下可稳定保存36h，4℃可保存72h。
?检测简便快速（1h），仅需50μl外周血样本，而血培养则需要5d左右的时间。
?PMNCD64检测的特异性和灵敏性均优于CRP和PCT，将PMNCD64与CRP、PCT联合使用可以显著提高细菌感染诊断的特异性和准确性。
?服用皮质激素、抗风湿类药物、免疫抑制剂的患者其PMNCD64表达不受影响。
PMNCD64流式检测的临床意义！
?诊断细菌感染性疾病PMNCD64在诊断脓毒症和全身感染敏感性可达90%以上，特异性为90%~%，且CD64的升高水平与感染严重程度密切相关。
?诊断自身免疫性疾病活动期和并发感染MausuiT等研究表明PMNCD64和CRP在类风湿性关节炎并发感染时均显著升高，而在类风湿性关节炎活动期无并发感染时，仅CRP升高，PMNCD64表达不变。
?用于鉴别外科手术后是否并发感染的指标。
?感染患者抗生素疗效检测。
如何使用CD64武器鉴别细菌感染？
PMNCD64检测结果可用CD64阳性细胞百分率、CD64的平均荧光强度（MFI）和CD64指数表示，其中CD64指数计算在检测细菌感染时的灵敏性和特异性均优于前两者。
那么CD64指数方法如何使用呢？咱们细听以下文章解析。
第一篇文章测定了14~16岁青少年人群的PMNCD64正常参考值。选用52例14~16岁的健康体检者为检测对象，静脉取血，采用CantoII流式细胞仪检测CD64的表达，使用CD14抗体确定单核细胞群，并分别圈出淋巴和中性粒细胞亚群（如下图），采用以下公式计算CD64指数。最终得到14~16岁青少年人群的CD64指数正常参考值为＜1.53。
CD64检测的流式图形
注：P2位淋巴亚群，P3为单核细胞群，P4为中性粒细胞群
第二篇文章探讨了PMNCD64指数的流式检测方法。作者收集了非细菌感染组外周血样本92例，细菌感染组41例，采用Calibur流式细胞仪检测CD64的表达，通过CD45设定淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞亚群（如下图）。同样采用上述文章中的公式计算CD64指数。结果表明CD64指数阈值设定为1.84时，诊断细菌感染的敏感性和特异性最高，分别为87.8%和95.7%。
CD64检测的流式图
注：a.R1为中性粒细胞亚群，R2为淋巴亚群，R3为单核细胞群；b,e.分别为中性粒细胞亚群对应的CD64散点图和直方图；c,f.分别为淋巴亚群的CD64散点图和直方图；d,g.分别为单核细胞群的CD64散点图和直方图
综上所述，PMNCD64指数在诊断细菌感染上兼具检测速度快、灵敏性和特异性高的优势，是良好的诊断细菌感染的指标。
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作者：BD生物科学上海卓越中心李婷Helen.Li2
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